WEB这是一个知乎问答页面,介绍了shRNA(短发卡RNA)的结构和功能,以及它如何通过RNA干扰(RNAi)的方式来沉默目标基因的表达。页面还提供了相关的回答和参考链接,以及shRNA的设计类型和优缺点。
WEB本文介绍了RNA干扰的概念、机制和分类,以及siRNA和shRNA的结构、生成和作用的不同。siRNA是一种双链RNA分子,由Dicer酶加工而成,可直接与mRNA互补并降解;shRNA是一种单链RNA分子,由Dicer酶加工而成,可转运到细胞核并与DGCR8复合物处理成siRNA。
WEBMar 27, 2023 · shrna在体内通常依靠rna聚合酶iii进行转录,常用人u6和人h1启动子驱动,据报道,在小鼠大脑中u6启动子驱动shrna的干扰效果比h1启动子更好。 1. 选择靶标: siRNA的作用范围可以是靶标基因mRNA的任何位置,一般推荐选择多个靶标, 选择靶标时要注意其特异性 。
WEBMay 31, 2023 · Title: 如何验证shRNA质粒构建的有效性. 摘要: shRNA是一种常用的基因沉默工具,能够通过RNA干扰机制来靶向特定基因的转录,从而研究基因功能。然而,在使用shRNA之前,需要验证质粒构建的有效性,以确保其能够成功抑制目标基因的表达。
WEBMar 27, 2023 · shRNA的RNAi机制与microRNA成熟机制一样,因此,shRNA也可以由聚合酶II型启动子驱动表达。 这类启动子包括广谱启动子(如CMV、CAG和EF1a等)和组织特异性启动子(如hSyn、TBG和cTnT等),可以启动较大的基因转录,且需要polyA等转录终止信号。
WEBJun 12, 2023 · 以Cre on shRNA为例,该服务是使用FLEX(flip-excision)系统实现shRNA诱导表达。 FLEX是一种非常强大的控制基因表达的方法,它采用2对异质、反向的loxp位点(loxP和 lox2272 ),经过DNA翻转产生带有不同loxp位点的DNA翻转,防止进一步的DNA翻转,实现目标基因不可逆的翻转。
WEB本文介绍了RNA干扰技术的发现历史和原理,以及siRNA和shRNA的结构和作用机制的区别的结构和作用机制的区别。siRNA是RNAi途径中的中间产物,是对特定信使RNA(mRNA)进行降解的指导要素,而shRNA是基于载体的短发夹RNA,可以在细胞内转 …
WEB本网页收集了多位用户对于RNA干扰时用siRNA还是dsRNA的看法和经验,以及相关的技术方法和注意事项。siRNA是一种小型RNA,可以通过RISC复合体对特定mRNA进行干扰,而dsRNA是一种双链RNA,可能会引起细胞免疫反应,因此在体内应用时需要消除或减少其形 …
WEBJul 11, 2022 · 本文介绍了shRNA的原理、种类和构建服务,以及如何根据不同的实验需求选择合适的shRNA载体和启动子。shRNA是一种利用RNAi机制实现基因敲低的技术,但是敲低效率的标准并不存在,因为不同的基因和载体有不同的敲低效率。
WEBDec 4, 2023 · 本文介绍了shRNA干扰载体的设计原则,包括靶点选择、启动子选择、茎环结构等,并推荐了维真生物提供的多种shRNA质粒构建服务,如单个、套餐、多和1、以4 in 1、mir30-based和诱导性shRNA质粒。如果您对shRNA质粒构建感兴趣,可以联系维真生物或关注微信公众号。